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Westernblot成像中得到完美荧光印迹的方法:湿膜快速转干膜
点击次数:3598 发布日期:2018-11-26  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

      Westernblot荧光印迹膜成像:干膜or湿膜

干膜,还是湿膜成像:这是一个问题。

经过漫长的一天实验做荧光蛋白印迹,首先成像,以便可以看到实验成果。 这项工作流程没有任何问题,但这可能无法生成最佳图像。 如果您正在进行定性实验或具有高丰度的蛋白,那么对膜进行成像是很好的。 然而,许多研究人员已经转向荧光蛋白印迹法来定量分析低表达目的蛋白。

湿膜不适合成像,因为它们在成像过程中会慢慢变干,导致数据不一致。 由于湿膜的自发荧光与干膜不同,因此需要特别注意防止膜在成像过程中变干。 这意味着在成像过程添加缓冲液或将印迹膜放在塑料包装中以防止干燥。 如果您曾经对湿的印迹进行成像,您就知道在长时间曝光期间防止膜干燥是一件麻烦事。 使用荧光印迹的一大优势是随时可进行成像。湿膜经历长时间曝光时,看到高背景并不罕见。 高背景对灵敏度产生负面影响,使低丰度目标的检测更具挑战性。

湿膜成像显然是不方便的,并且不太理想,但这并不意味着您需要等待数小时才能使膜干燥。 荧光蛋白印迹后快速干燥膜的方法是将其浸入甲醇中。 所需要的是PVDF膜在100%甲醇中快速浸泡15秒。 硝酸纤维素膜不耐化学品,因此使用20%甲醇代替。 酒精会从膜的孔隙中代出水分,加速干燥,让您更快地对印迹进行成像。 这个快速提示将立即为您提供一个完美的印迹!

荧光干膜成像提高灵敏度
来源:北京深蓝云生物科技有限公司
联系电话:010-57256059
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