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技术快报---Apogee超灵敏流式在微小颗粒检测领域的应用
点击次数:290 发布日期:2018-7-9  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

Apogee超灵敏流式分析仪,整合了最先进的光学、电子和流体学技术,具有超高的散射光灵敏度(70nm)和分辨率(10nm),不仅可以应用于细胞分析,还擅长微小颗粒的分析与检测,其在微生物、病毒学、肿瘤学和干细胞微囊泡及外泌体等多个领域均有着广泛的应用。

 

1.纳米材料

1.1.乳胶和二氧化硅混合物的检测

    悬浮微珠直径180nm,240nm,300nm,590nm,880nm和1300nm,加上绿色荧光的110nm和500nm。应用Apogee能够检测各个直径大小的微珠,并完美区分110nm的微珠与噪音。

1.2.标准物质质控

中国计量科学研究院研发并生产的细菌浊度标准物质以及颗粒粒度标准物质,均可以使用Apogee进行质量验证。相对其他方法具有快速、简单、准确等优势!

2.细菌

2.1.细菌绝对计数

       Apogee可以对细菌进行绝对计数,检测时间在10min内,并且无需任何试剂与耗材。中科院微生物所以及杜邦公司均使用Apogee进行细菌的快速定量检测。

2.2.细菌混合菌群分析

仅通过散射光,Apogee就能够清晰的将相差细微的微生物混合物进行分群和分析,在微生物学、食品检测和水质检测等领域具有显著优势。

2.3.特定细菌的检测

通过特异性荧光染料,对特定的待检细菌进行荧光标记,可以实现对特定的细菌检测。

2.4.细菌活性分析

    使用Apogee并结合特定的死活菌荧光染料,可以对待检细菌的活性进行分析,并准确检测出其死活菌的数量和比例。

2.5.单个细菌的检测

美国食品和药物管理局(FDA)刊发新文,采用Apogee流式,完善了大肠杆菌单细胞快速精准检测方案,9小时内完成了25个菠菜样品中的大肠杆菌检测。

《WilliamsA J, Cooper W M, Ramsaroop S, et al. Rapid flow cytometry detection of a singleviable Escherichia coli O157:H7 cell in raw spinach using a simplified samplepreparation technique》 

3.病毒

凯斯西储大学科学家使用Apogee检测了HIV-1病毒。相对传统流式,Apogee的超高分辨率可对将病毒细胞与碎片准确区分,借助荧光标记的辅助,获得更准确的数据结果。

《MM Bonar, JC Tilton. Highsensitivity detection and sorting of infectious human immuno deficiency virus(HIV-1) particles by flow virometry》

并且2016年默克公司研究人员还使用Apogee建立了人巨细胞病毒(HCMV)的分析方法,并将文献发表在Vaccine杂志上。

《Flask J, Hoang V M,Christanti S, et al. Use of flow cytometry for characterization of humancytomegalovirus vaccine particles》

4.微囊泡

细胞外囊泡是指从细胞膜上脱落或者由细胞分泌的双层膜结构的囊泡状小体,直径从40nm到1000nm不等。研究发现流式分析法已经成为囊泡检测的最优选择,但传统流式受散射光灵敏的限制,在胞外囊泡的检测上受限,Apogee的超灵敏度的散射光分辨率,很好的解决此问题。并且芬兰科学家建议使用Nano E囊泡作为外囊泡的研究标准,并使用Apogee完成了对Nano E囊泡的检测,文献于2016年发表在European Journalof Pharmaceutical Sciences上。

《Valkonen S, Van d P E, Bing A, et al. Biological reference materials forextracellular vesicle studies》 

5.外泌体

外泌体是直径约为30-150nm的小囊泡。作为细胞间信号传导的重要媒介,越来越多的研究揭示其作为多种重大疾病的生物标志物。当前Apogee已成为外泌体的主流检测方法。每年在国际胞外囊泡大会上,许多科学家展示的研究成果均采用Apogee超灵敏纳米流式细胞仪来进行胞外囊泡研究。2015年欧洲国家计量研究协会评定英国Apogee超灵敏纳米流式细胞仪为在微泡(<100nm)检测中最灵敏的系统。例如美国凯斯西储大学科学家使用Apogee摸索出一种更适合单个外泌体快速高通量分析的方法,文章发表在2016的Scientificreports上。

《Kibria G, Ramos EK, Lee KE, et al. A rapid, automated surface proteinprofiling of single circulating exosomes in human blood》 

 

6.肾结石

肾结石是一些晶体物质(如钙、草酸、尿酸、胱氨酸等)和有机基质(如基质A、酸性黏多糖等)在肾脏的异常聚积所致,为泌尿系统的常见病、多发病。纳米级的结石碎片会脱落于肾结石并进入尿液。加拿大科学家发现Apogee可对这些结石碎片进行精确分析,从而建立了一种无创伤,价格低廉,高通量的肾结石分型检测方法。文章于2016年发表在ScientificReports上。

《Novel Methods ofDetermining Urinary Calculi Composition: Petrographic Thin Sectioning ofCalculi and Nanoscale Flow Cytometry Urinalysis》

7.脑脊液生物标志物

    脑脊液生物标志物CSF可作为阿兹海默症和帕金森病的早期诊断标志。国外科学家利用Apogee开发出了针对CSF生物颗粒定量,成份和大小鉴定的超灵敏检测方法。为CSF的研究带来极大的便利,文章于2015年发表在Journal of Neuropathology & Experimental Neurology上。

《Yang Y, Keene C D, et al. Cerebrospinal Fluid Particles in AlzheimerDisease and Parkinson Disease》 

8.湖泊与海洋水质研究

    湖泊和海洋中含有混合悬浮细胞。悬浮液是非常理想的流式样本,但由于液体中单细胞生物体的直径分布较宽,约0.2µm到100µm,浓度高达约108/mL,普通流式难于直接进行检测,需要做繁琐的样本前处理,而Apogee流式无需处理样本,可直接用于检测,包含各种样本:病毒、细菌、蓝藻(藻类)、自养浮游植物(单细胞植物)、异养浮游动物(单细胞动物)。

 

来源:普瑞麦迪(北京)实验室技术有限公司
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