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赛默飞离心小课堂 |如何利用超速离心法纯化外泌体
点击次数:1842 发布日期:2018-4-21  来源:赛默飞

细胞作为我们生命最小的单位,我们有宏观的沟通,他们自然也有微观的沟通。而这细胞的“语言”,就是外泌体系统。

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外泌体系统的意义

简单的来说,细胞通过分离自己的一部分膜,把自己“情话”(核酸,蛋白等)包裹成外泌体释放出去,最后融入到别的细胞里进行沟通。对于我们人类来说,破解了外泌体系统等于破解了细胞沟通的密码,对于我们生命科学发展意义非凡。

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用超速离心法纯化外泌体

研究外泌体的第一步,那一定是得先把这些小家伙给抓住。虽外泌体分离市场上百花齐放。 但这些分离技术都在纯度上不尽人意。得到最纯的外泌体,揭开他们背后的故事,超速离心技术是最好的选择。

那么,

如何选择合适的离心机

进行外泌体离心分离?

赛默飞世尔是科学服务领域的世界领导者,旗下离心机产品一直以安全可靠与无微不至的便捷性著称。

▶Thermo Scientific Sorvall WX+系列超速离心机

卓越的离心性能:最大离心力达802,000 xg,满足外泌体纯化实验需要

多样的转头选择可离心从1.5 mL离心管到250 mL离心瓶的各式离心容器,满足您实验室离心各种应用的需要,尽显无以伦比的便捷性。

·Auto-Lock转头自锁,3秒即可更换转头实现一机多用;Auto-ID瞬时转头自动识别

·第三方认证Clickseal生物安全性密封技术,防止气溶胶产生,保护实验人员的安全

·永不疲劳的Fiberlite转头,重量轻,硬度大,耐腐蚀,提供15年质保,终身无需减速使用

 
 

近日,麻省综合医院(MGH)的研究人员开发的一款新型微流体装置。 该装置可以利用微流控技术快速检测血液中癌症细胞来源的外泌体,以此作为癌症诊断手段。

通讯作者Shannon Stott教授说,他们的设备能够从在血液中数十亿细胞外囊泡中挑选出肿瘤特异的细胞外囊泡。这将为未来癌症诊断及监控提供新的方法。[1]

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由此看来,外泌体的应用可谓是越来越广泛了。这一技术也符合了当今精准医疗的热点“液体活检”思想, 应用前景可谓十分的光明。关于液体活检,它另一个简单粗暴的名字叫“滴血验癌”。想了解“液体活检”的看官可以继续关注我们的微信公众号。我们往后会有详细叙述。

 

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那么,超速离心技术在外泌体研究中到底是如何运用的呢?

用超速离心法纯化外泌体

参考实验流程

1.首先取细胞培养液上清或体液作为样本,低速离心300 xg,10 min,分离出细胞;留上清 2000 x g离心,10 min,去除死细胞。

2.剩下上清继续提高离心力到10000 xg,30 min,去除细胞碎片,处理好后的上清可准备进行超速离心步骤。以100,000 xg的离心力,离心70 min,得到粗制外泌体沉淀(含有少量杂蛋白)。

3.用PBS重悬外泌体沉淀,再次100,000 xg,离心70 min,即可得到纯净的外泌体。[2]

如何选择合适的离心机进行外泌体离心分离?

▶Thermo Scientific™ Sorvall™ WX+ 系列超速离心机

卓越的离心性能:最大离心力达802,000 xg,满足外泌体纯化实验需要

多样的转头选择,可离心从1.5 mL离心管到250 mL离心瓶的各式离心容器,满足您实验室离心各种应用的需要,尽显无以伦比的便捷性

Auto-Lock™ III 转头自锁系统,3秒即可更换转头实现一机多用;Auto-ID瞬时转头自动识别

第三方认证ClickSeal™生物安全性密封技术, 防止气溶胶产生保护实验人员的安全

永不疲劳的Fiberlite™转头,重量轻,硬度大,耐腐蚀,提供15年质保,终身无需减速使用

推荐配置方案:

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*此方案仅供参考,并未涵盖所有转头、吊篮、适配器及离心管。 如有需要详细配置方案,请联系当地销售。

文章来源:

[1] Engineered nanointerfaces for microfluidic isolation and molecular profiling of tumor-specific extracellular vesicles. Nat. Commun. 2018,9(1):175.

[2] Théry, Clotilde, et al. “Isolation and Characterization of Exosomes from Cell Culture Supernatants and Biological Fluids.” Current Protocols in Cell Biology, 2006, doi:10.1002/0471143030.cb0322s30.

来源:赛默飞世尔科技(中国)有限公司
联系电话:021-61621892
E-mail:sales.china@thermofisher.com

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