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伯豪生物芯片服务助力客户circRNA研究新成果
点击次数:1627 发布日期:2017-8-15  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

伯豪生物芯片服务助力客户circRNA研究新成果

研究背景
放射治疗是肝癌治疗的有效手段之一,然而放射性肝纤维化是肝癌放射治疗的常见并发症,制约肝癌放疗效果。放射性肝纤维化的发病机制仍未明晰,有待进一步研究。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类广泛参与多种生物学进程的非编码RNA,在人类多种疾病的发生和发展中发挥重要作用。本研究通过伯豪生物提供的circRNA芯片对正常和接受放疗的肝星状细胞中差异表达的circRNA进行分析,探讨其在放射性肝纤维化发病过程中的作用。

研究结果

1.差异circRNA筛选

       为探究放疗对肝星状细胞内circRNA表达变化的影响,研究人员利用circRNA表达谱芯片(伯豪生物提供),对正常人肝星状细胞株LX2细胞和接受8Gy X线照射的LX2细胞进行circRNA检测,发现照射后LX2细胞中差异表达(变化2倍以上)的circRNA共809个,其中表达上调179个,表达下调630个。

2. qRT-PCR验证circRNA的表达

       研究人员随机选取表达上调和下调的circRNA各3个进行qRT-PCR,结果显示与正常LX2细胞相比,hsa_circ_0072765、hsa_circ_0071410和hsa_circ_0054345表达明显上调,而hsa_circ_0070963、hsa_circ_0061893和hsa_circ_0013255表达明显下调,与芯片结果一致。

3. 差异circRNA功能分析

       那么,这些差异的circRNA主要参与哪些生物学功能和信号通路呢?GO富集分析显示,这些表达上调的circRNA的亲本基因主要涉及到细胞有丝分裂、细胞器组成和细胞周期过程,而表达下调的circRNA的亲本基因主要涉及到细胞组分、细胞质和蛋白结合等;pathway富集分析显示,表达上调的circRNA的亲本基因主要涉及到“泛素介导的蛋白酶解”、“细胞周期”和“RNA转运”等,而表达下调的circRNA的亲本基因主要涉及到“磷酸戊糖途径”、“粘多糖降解”和“磷脂酰肌醇信号系统”等。
 
 

4.预测与circRNA互作的miRNA

       既往报道circRNA可作为miRNA海绵发挥功能,为挖掘本研究中异常表达的circRNA的潜在生物学功能,研究人员运用TargetScan等预测网站对能够与circRNA结合的miRNA进行预测,结果显示共有704个circRNA与miRNA存在结合位点,并将上述已验证的circRNA及其预测评分较高的5个miRNA的互作网络采用cytoscape绘制构图。

5.沉默hsa_circ_0071410可缓解辐射诱导的肝星状细胞活化

       前期生物信息预测发现hsa_circ_0071410与miR-9-5p存在3个结合位点且既往研究报道miR-9-5p可抑制肝星状细胞活化。基于此,研究人员检测发现miR-9-5p在接受照射的LX2细胞中低表达,而沉默hsa_circ_0071410的表达可升高miR-9-5p的表达,且缓解辐射诱导的LX2细胞活化,提示hsa_circ_0071410与miR-9-5p的互作可能参与放射性肝纤维化的发生发展。
 

研究结论

       本研究应用circRNA芯片筛查出在接受放疗的肝星状细胞中差异表达的circRNA,并通过生物信息学分析,挖掘出这些差异表达基因的潜在功能和与miRNA的互作网络,为放射性肝纤维化的研究提供新的思路。

原文出处:
Chen Y, Yuan B, Wu Z, Dong Y, Zhang L, Zeng Z(2017).Microarray profiling of circular RNAs and the potential regulatory role of hsa_circ_0071410 in the activated human hepatic stellate cell induced by irradiation.Gene,2017,629:35-42. 
来源:上海伯豪生物技术有限公司
联系电话:021-51320288-8136
E-mail:market@shbio.com

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