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Power Green qPCR Mix

     最后更新:2018-2-9
Power Green qPCR Mix
试剂名称:Power Green qPCR Mix
英文名称:Power Green qPCR Mix
国产/进口:国产
产地/品牌:广州东盛生物科技有限公司
规格:1 ml/1 ml×5 
货号:P2101/P2102
CAS号:
参考报价:400/1800
销售商:广州东盛生物科技有限公司
总点击数:1963
本半年点击数:65
产品类别:分子生物学试剂
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  • 性能参数
  • 公司简介

Power Green qPCR Mix

产品组分

组分

P2101

P2102

2×Power Green qPCR Mix

1 ml

1 ml×5

超纯水

1 ml

1 ml×5

ROX Reference Dye, 100X

20μl

100μl


●  P2101可进行100次反应(20μl标准PCR反应体系每次使用10μl);

●  P2102可进行500次反应(20μl标准PCR反应体系,每次使用10μl)。

 

质量控制

    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染;功能测试:qPCR分析扩增的特异性、敏感性与可重复性。

 

保存条件

    -20℃避光保存2年。

产品说明

    Power Green qPCR Mix是2×浓缩的实时定量PCR扩增的预混合溶液,含有Hotstart Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液、SYBR® Green Ⅰ等扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时,仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行实时定量PCR。本产品与绝大多数厂商的实时荧光定量PCR仪兼容,如Applied Biosystems、Eppendorf、Corbett、Bio-Rad和Roche。

    本产品适用于快速荧光定量PCR扩增,适用范围广,具有高特异性,高效率,高重复性特征,无非特异性扩增,实验结果可信度高。

    Hotstart Taq DNA聚合酶采用了基于核酸适配子 (aptamer) 的抑制剂,不仅使用方便,而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。这种基于核酸适配子的抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合,当温度低于 45℃ 时强抑制聚合酶活性,因而能够在室温下建立反应。在72℃时TaqDNA聚合酶即能被激活,无需另外的高温温育步骤。采用这种双重热启动Taq DNA聚合酶进行PCR扩增,能够获得更高的扩增效率、特异性。

应用举例--------------------------------------------------------------------

反应体系 

 样本溶液                   <100ng

 Primer 1(10 μM)                   0.4μl

 Primer 2(10 μM)                   0.4μl

2×Power Green qPCR Mix                 10μl

 dd H2O                        补足至20 μl

 

如果溶解曲线出现杂峰,可以减少Mix用量

特异性反应体系

 样本溶液                    <100ng

 Primer 1(10 μM)              0.4μl

 Primer 2(10 μM)              0.4μl

2×Power Green qPCR Mix           8μl

 dd H2O                    补足至20 μl

 

如果对痕量模板的检出率低,可以增加Mix用量

高灵敏反应体系

样本溶液                        <100ng

 Primer 1(10 μM)                 0.4μl

 Primer 2(10 μM)                0.4μl

2×Power Green qPCR Mix            12μl

 dd H2O                         补足至20 μl

反应条件(三步法)

    94℃     3min

95℃    15s

Tm -5℃  15s

72℃     30s

×40Cycles(data collection)

反应条件(二步法)(Primer Tm≥60℃)

94℃    3min

95℃    15s

60 ℃   30s

×40Cycles(data collection)

注:三步法重复性更好,且适合不同退火温度。

注意事项--------------------------------------------------------------------

1.将Power Green qPCR Mix设定为总反应体积的1/2,其他的反应组分请参照 最优条件进行调整。 最优条件确定后,如需改变反应体系总体积,各个组分按相同比例改变。

2.引物最佳终浓度为0.2-0.6 μM。引物浓度越高,扩增效率越高,但添加量过高则可能引起非特异的扩增而导致实验失败。

3.在进行反应体系配置时,通常除待检样品之外的组份预混成n+x倍(n为样品数,x为分注损耗)的混合液,然后分注到各管,最后在每管中分别加入相应的待检样品液。

4.本产品依赖温度激活DNA聚合酶,低温时抑制酶活性,高温时激活酶活性, 均在极短时间完成。每一步PCR都会有低温抑制高温激活的效果,所以特异性更好。不需要PCR反应前95℃ 10min加热激活,使酶活下降,影响PCR扩增效率、定量精度。Aptamer是合成的化学物质,与Taq抗体hotstart法相比不会引入外源DNA污染。

5.模板的添加量通常在100ng以下,不同来源的DNA,最好进行梯度稀释,确定最佳模板量。

仪器选择指南

荧光定量仪器

Rox Reference Dye

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT

Step One™,  and Step One Plus™

High Rox (2%)

ABI 7500 Rox Low  

Stratagene Mx3000P®, Mx3005P™, and Mx4000® 

Low Rox (0.4%)

Rotor-Gene™; DNA Engine Opticon™, Opticon® 2,

and Chromo 4™ Real-Time Detector;

No Rox Mastercycler® ep realplex, Smart Cycler®, Roche LightCycler® 480, Bio-Rad CFX96

No Rox

bio-equip.com
广州东盛生物科技有限公司成立于2005年2月,公司专注于研发和生产基础分子生物学试剂。现已经成为国内最大的PCR相关产品、DNA电泳相关产品、DNA纯化相关产品生产厂家之一.自成立之初,东盛就认识到产品质量是企业高速成长的生命线。为此,在每一类产品的生产过程中,逐步建立起有针对性的、标准严格的生产工艺与质控体系,确保产品的规模化生产与质量稳定。同时,根据市场的需求,不断地进行产品改进与新产品研发,紧跟现代生物学研究与应用的前进步伐!经历数年的市场检验,东盛的产品已逐步得到国内广大科技人员的欢迎和认可。在大家的共同努力下,东盛已成长为国内领先的基因克隆与基因分析解决方案供应商。 
2010年3月,东盛生物聘请权威质量认证机构BSI对公司的研发及技术服务体系进行ISO9001:2008认证,使东盛成为国内最早通过一流标准认证的民营生物技术类企业。为客户提供最好的基础分子生物学试剂,协助客户顺利完成科研工作,在生物事业贡献自己力量,一直是东盛生物不懈的追求。
 
售后服务
针对产品使用过程中遇到的问题,提供咨询与解决方案,以及产品试用装申请解答。qq:1648531827
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