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环凯推出恒温扩增荧光法检测试剂盒
点击次数:775 发布日期:2017-11-7  来源:www.huankai.com

环凯近期推出全新高通量快速检测试剂盒,该试剂盒基于基于环介导恒温扩增技术(LAMP)荧光法检测技术,无需常规PCR中变性、退火、延伸等步骤不同温度设计要求,只需提供一个适宜的恒定温度即可。

一、技术原理:

试剂盒基于环介导恒温扩增技术(LAMP)荧光法检测,利用两对特殊引物和具有链置换活性的Bst DNA聚合酶,使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构,引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应,实现在恒温条件下(60-65℃)进行连续快速扩增。反应体系中加入了显色指示剂,阴阳性结果显色差异显著,扩增结束后可以通过观察荧光显色剂的颜色变化判读结果,无需开盖避免了扩增产物交叉感染性的可能性。LAMP是一种新型的恒温核酸扩增技术,与常规PCR相比,LAMP技术更适合现场高通量快速检测,具有简单、快速、特异性强的特点。

二、应用范围

恒温扩增荧光法检测技术可运用于快速检测食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、单核增生李斯特菌、副溶血弧菌、大肠杆菌O157:H7、阪崎肠杆菌、小肠结肠耶尔森氏菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、产气荚膜梭菌等微生物检测

应用于食品快速检测有两种方式:

1、快速筛查。对食品样品快速增菌后,直接采用基因检测试剂盒来快速筛查有没可疑致病菌(对大多数致病菌在13小时内即可完成筛查);

2、快速鉴定。对食品样品进行增菌,平板分离,使用基因检测试剂盒对可疑菌落进行快速准确的鉴定(1小时内完成鉴定)。

三、快速筛查食品中致病菌操作流程

 

 

四、快速鉴定可疑菌落操作流程

菌落检测流程

、环凯恒温扩增试剂盒特点

操作简单:通过几部加样后,60-65℃范围内恒温条件下即可完成扩增。

使用便捷:一管式冻干,免去繁琐的配制步奏。

仪器简单:扩增条件简单,能提供恒温装置即可。

特异性高:比传统PCR灵敏度高10-100倍,可检测5-20个拷贝。

快速判读:使用合适的增菌液收集到足够菌体后,40-60分钟内可完成检测,肉眼观察颜色变化即可判读结果。全部检验流程仅需约13h(详细检验流程参见说明书)。

、环凯恒温扩增试剂盒组成


七、环凯恒温扩增试剂盒操作指南

恒温扩增试剂盒产品列表

食源性致病微生物检测系列

货号

规格

最低检验限

沙门氏菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD05L

24tests

14 CFU/Test

金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD04L

24tests

15 CFU/Test

志贺氏菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD06L

24tests

6 CFU/Test

单核增生李斯特菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD07L

24tests

8 CFU/Test

副溶血弧菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD08L

24tests

4 CFU/Test

大肠杆菌O157:H7核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD09L

24tests

29 CFU/Test

阪崎肠杆菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD10L

24tests

23 CFU/Test

小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD11L

24tests

18 CFU/Test

 

 

 

 

水源性致病微生物检测系列

货号

规格

最低检验限

铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD01L

24tests

8 CFU/Test

粪肠球菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD02L

24tests

9 CFU/Test

产气荚膜梭菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

KJD03L

24tests

11 CFU/Test

恒温扩增快速检测所需配套增菌培养基列表

检测项目

货号

品种名称

规格

铜绿假单胞菌

027047

铜绿假单胞菌增菌肉汤

250g/瓶

粪链球菌

028340

叠氮化钠葡萄糖液态培养基

250g/瓶

产气荚膜梭菌

027145

梭菌增菌培养基

250g/瓶

金黄色葡萄菌

024052

7.5%氯化钠胰酪胨大豆肉汤

250g/瓶

沙门氏菌

023030

四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)

250g/瓶

SR0040

TTB配套试剂

2×5支/盒

志贺氏菌

023141

志贺氏菌增菌肉汤

250g/瓶

SR0380

志贺氏菌增菌肉汤配套试剂

10支/盒

单增李斯特菌

026040

李氏增菌肉汤(LB1,LB2)基础

250g/瓶

SR0100

李氏增菌肉汤LB1配套试剂

2×5支/盒

副溶血性弧菌

025015

3%氯化钠碱性蛋白胨水

250g/瓶

大肠杆菌0157:H7

028112

改良EC肉汤基础

250g/瓶

SR0030

改良EC肉汤配套试剂(新生霉素)

10支/盒

阪崎肠杆菌

022212

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤基础(MLST)

250g/瓶

SR0180

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤配套试剂

10支/盒

小肠结肠耶尔森氏菌

029905

改良磷酸盐缓冲液(PSB)

250g/瓶

十、恒温扩增快速检测需要配套的仪器及耗材列表

所需的仪器

规格

备注

侧边过滤样品均质袋(食品检测)

容量400ml,袋子规格190*300mm

固体食品样品处理时用于样品均值之用。采用过滤袋可显著减少样品残渣,利于微生物的分离及DNA的提取。

无菌微孔滤膜

直径47mm,孔径0.22/0.45微米,400片/盒(无菌独立包装)

 

可调移液器

1-10 μL、10-200 μL和100-1000 μL各一把

 

高速振荡样品前处理器

ShockMixer-1

均质频率93次/s,相比拍击均质器9次/s的均质频率,高速振荡样品前处理器能产生高频脉冲波,有更好的微生物释放率。

样品碎片少:样液澄清,易于取样、过滤,使用移液枪也不怕会堵塞枪头,利于微生物的分离及DNA的提取。

更少的破袋率、更广的样品适用性:无需打碎样品,不会导致样品处理袋的破裂,样品适用性更广,甚至可用于硬糖,压片药丸、鱼骨、核桃等质地坚硬的样品。

可预设均质时间(1-12分钟)

固体食品样品均质之用。

 

多联不锈钢过滤系统

快接设计,整机可拆卸,方便清洗消毒

专利产品:特殊的“三爪式”不锈钢滤膜扣具,不需要额外的夹具,便于单手操作和滤膜的取放,操作简单,使用效率更高。

滤器、滤器连接件、阀门、滤器支架、滤器上盖、滤膜支撑垫等主要配件均采用316优质不锈钢生产,不易损坏。

气液两用隔膜真空泵(直排泵),过滤后的液体直接通过泵,不需要真空贮液瓶,简化了过滤系统的配置,节省工作空间,操作更方便快捷

配置火焰灭菌器,灭菌更便捷。

用于水质样品过滤集菌。

 

高速离心机

最高转速:16500

最大离心力(×g):18780

最大容量:12×10ml

控制及驱动系统:交流变频电机,微机控制,直接驱动

 

恒温金属浴

温度设定范围:0℃~100℃

温度显示分辨率:0.1℃

升温时间:≤8min(室温20℃~100℃)

降温时间:≤8min(100℃~4℃)

温控精度:≤±0.2℃

温度波动度:≤±0.1℃ 温度均匀性:≤±0.5℃

时间设定范围:0~99h59min

循环设置功能、程序段设置功能、自动记忆、QC报告打印

 

 
   
能准确提供60~65 ℃恒温条件的任何通用设备,如水浴锅、恒温箱、恒温金属浴、PCR仪等。

 

 

发布者:广东环凯微生物科技有限公司
联系电话:020-32078333-8617
E-mail:2859868998@qq.com


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